La funzione principale di un tampone PCR (polimerasi a catena) è quella di fornire un ambiente adatto per l'enzima della DNA polimerasi per funzionare efficacemente durante il processo di amplificazione. In particolare, un tampone PCR in genere svolge diversi ruoli chiave:
- Stabilizzazione del pH: il tampone mantiene un livello di pH ottimale (di solito circa 8. 0) che è necessario per l'attività della DNA polimerasi.
- Resistenza ionica: fornisce la forza ionica appropriata, che è cruciale per l'attività enzimatica e la stabilità del duplex di DNA durante la denaturazione e le fasi di ricottura.
- Ioni di magnesio: la maggior parte dei tamponi PCR contiene ioni di magnesio (Mg²⁺), che sono cofattori essenziali per l'attività della DNA polimerasi. Aiutano a stabilizzare la struttura del DNA e facilitano la reazione enzimatica.
- Solubilità nucleotidica: il tampone migliora la solubilità dei nucleotidi (DNTP) e di altri componenti, garantendo che siano disponibili per la polimerasi da incorporare nel crescente filamento di DNA.
Nel complesso, la PCRrespingenteCrea un ambiente biochimico ottimale per l'amplificazione di sequenze di DNA specifiche.
